该研究首次将SARS-CoV-2 spike mRNA与ICG介导的光热疗法（photothermal therapy，PTT）联合应用于浅表肿瘤治疗，在4 T1乳腺癌模型中，该联合策略取得了显著的肿瘤生长抑制效果（75.1%），增强CD 8 + T细胞浸润，并使全身毒性最小化，这项研究开创了PTT和基于mRNA的肿瘤标记免疫疗法在微创MN平台中的整合，为增强浅表癌症治疗提供了有前途的策略。

IML/MNs 为 10×10 阵列的双层结构锥形微针，上层载有 IML，下层为 PVP 基底，微针尺寸及表面形貌经扫描电镜表征（图6A、6B）。IML 载入微针后，多分散指数与包封率稳定，粒径、表面电荷小幅变化，细胞表达略有下降。体外热稳定性显著优于 IML 溶液，印证脱水可提升 mRNA/LNP 储存稳定性。微针封口膜穿透深度为 393.54±23.95μm，具备皮肤穿透能力；其穿透率随介质厚度增加骤降，252μm 厚度下穿透率 100%，756μm 时完全无法穿透（图 6C）。离体猪皮实验中，微针1分钟溶解近 50%，2 分钟溶解达 80%（图 6D）。光热性能测试表明，近红外照射下，载药微针体外可快速升温至 60℃，空白微针无光热效应；体内实验中，载药微针处理的肿瘤光照后升温至 50℃，与对照组差异显著（图 6E、6F）。采用 Cy7 标记胆固醇示踪荷瘤小鼠体内 IML 分布：静脉注射组荧光信号集中于上腹部，肿瘤无明显信号；微针处理组信号主要富集于肿瘤，仅存在少量淋巴途径的全身渗漏（图 6G）。AUC 定量分析证实瘤内注射 IML/MNs 分布特性优异。给药 24 小时后主要器官定量检测显示：静脉注射组药物主要富集于肝（68.1%）、脾（15.6%），肿瘤蓄积仅 3.1%；瘤内注射微针组肿瘤药物分布达 48.4%，肝脏渗漏降至 23.7%。相较静脉给药，瘤内微针给药使肿瘤药物蓄积提升 15.6 倍，肝脏分布减少 65.2%（图 6H、6I）。

图6. IML/MN的表征和生物分布。IML/MN的显微镜图像（A）和SEM图像（B）。（C）MN处理后Parafilm膜的显微镜图像，比例尺600μm。（D）在猪皮肤中施用2分钟后IML/MN的显微图像。（E）用IML/MN处理的4只T1荷瘤小鼠的热成像和（F）温度-时间曲线。（G）通过i. v.注射施用顶L或通过i.t.注射施用IML/MN的小鼠的发光成像，n = 3.施用后24小时，主要器官和肿瘤中的顶L的生物分布（H）和定量（I）。