脂质纳米粒（LNPs）彻底革新了核酸传递技术，极大推动了基于 mRNA 的治疗研究进展。当前，相关研究主要聚焦于脂质成分，而制备溶液对 LNP 性能的影响却尚未得到充分探究。

本研究系统地考察了 pH 值、盐类类型及其浓度，在 LNP 关键制备溶液，即 mRNA 水溶液、稀释液、交换液和储存液中的作用，并评估了这些因素对基于 SM102 的 mRNA/LNP 的理化性质、稳定性以及表达效率的影响。

研究结果显示，mRNA 水溶液的 pH 值极为关键，当 pH 值为 4 时，包封效率和细胞表达均达到最佳状态。交换液的 pH 值对生物分布有着显著影响，尤其是在静脉注射和肌肉注射后肝脏的特异性表达。研究还确定，蔗糖是提高冻融稳定性的关键因素，浓度为 300 mM 时，可最大程度地降低聚集和 mRNA 泄漏。此外，制备溶液会影响 LNP 的结构完整性，进而对其体内外表现产生作用。这些发现突出了制备条件在优化 LNP 配方以用于临床应用中的重要意义，为改进治疗设计和传递方式奠定了基础。

LNP关键制备溶液：mRNA水溶液、稀释液、交换液和储存液

研究团队综合考量基于理化性质与体外转染效率的制备条件，对制备流程予以优化（图 5A），同时探究了由不同溶液形成的 LNP 的理化特性、体外转染效率（图 5B）以及体内表达情况（图 5C、D 和 G）。此外，研究团队还针对不同 LNP 在小鼠体内经静脉注射（i.v.）或肌肉注射（i.m.）后的表达展开探索。选用 BALB/c 小鼠，通过肌肉注射或静脉注射的方式，接种包裹有荧光素酶 mRNA（0.25 mg/kg）的 LNP。在注射 6 小时后，向小鼠腹腔注射 D - 荧光素钾盐溶液（150 mg/kg）。借助锐视科技的二维光学活体成像系统（IMAGING 200）及配套分析软件，对肝脏及注射部位的荧光素酶表达进行监测与量化。